Last Night Shift er et førstepersons gyserspil, der skaber en uhyggelig atmosfære og spænding. Spillet har en gåsimulator og psykologiske horrorgenreelementer. Handlingen udvikler sig ret hurtigt og engagerer spillere fra begyndelsen. Spillere løser milde gåder, søger efter skjulte genstande og fuldfører forskellige mål.
En medarbejder ankommer til sin nattevagt på motellet. I aften bliver hans sidste aften på dette job. Hans glade kollega, Sarah, tager hjem for natten, og han bliver alene. Hans sidste nat virker lige så kedelig som enhver anden på motellet. Som altid er det et tomt, glemt sted. Manden udfører sine sædvanlige pligter, da han pludselig begynder at se foruroligende, blodfortyndende syner.